Этаноловый тест

Протаминсульфатный тест (Lipinski et al., 1967)

Этаноловый тест

13 января 2012

При наличии в плазме заблокированных фибринмономерных комплексов добавление протаминсульфата приводит к образованию в ней сгустка.

Забор крови производится так же, как и при постановке этанолового теста. Разница лишь заключается в том, что после получения плазмы, богатой тромбоцитами, ее дополнительно центрифугируют при 4000 об/мин в течение 20 мин.

К 0,4 мл плазмы, бедной тромбоцитами, в условиях силиконирования и охлаждения добавляют 0,1 мл 1% раствора протамин-сульфата. Немедленно включают секундомер, содержимое пробирки перемешивают и ставят на водяную баню. Результаты определяют через 15 и 30 мин.

Тест считается положительным, если образуется либо гомогенный сгусток, либо несколько разорванных сгустков.

Протаминсульфатный тест часто (хотя несколько реже, чем этаноловый) бывает положительным при ТГС.

Следует заметить, что эти тесты надо ставить одновременно» так как они дополняют друг друга.

В зависимости от характера реакции (хлопья, нити, сгусток) можно рассчитать концентрацию (приблизительную) продуктов деградации фибриногена и фибрина (Д. М. Зубаиров и сотр. 1983).

Количественный метод определения фибриногена В (В. Г. Патеюк, 1978)

Принцип метода основан на способности фибриногена В (комплекс полных и неполных фибринмономеров, соединенных с ранними и поздними ПДФ) выпадать в осадок под влиянием спиртового раствора бетанафтола.

В пробирку вносят 0,5 мл 1,34% оксалата натрия и из вены без жгута или при очень легком ее пережатии толстой короткой иглой забирают кровь (4,5 мл), которую центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10 мин.

Плазму отсасывают и вносят по 1 мл в 2 пробирки.

Затем в 1 пробирку наливают 0,2 мл 50% раствора спирта, в другую — такое же количество 2% раствора бетанафтола, разведенного на 50% спирте (концентрация спирта обязательно контролируется спиртометром).

Обе пробирки оставляют при комнатной температуре на 10 мин. Появление хлопьев во второй пробирке свидетельствует о наличии фибриногена В. По интенсивности выпадения хлопьев оценивается качественная реакция (от 1 + до 4+).

После этого пробирки слегка встряхивают и их содержимое фильтруют через заранее взвешенные обеззоленные фильтры, которые высушивают в термостате до постоянного веса. Разница между весом 1-го фильтра до и после фильтрования и высушивания содержимого 1-й пробирки свидетельствует о наличии свернувшихся белков под влиянием спирта и в расчет не принимается.

Обычно эта величина невелика. Разница между весом 1-го и 2-го фильтра после высушивания свидетельствует о наличии фибриногена В.

Фибриноген В в норме всегда отсутствует. Наличие его свидетельствует о развитии ТГС.

Определение ранних нитей фибрина (А. Д. Планова, 1971)

При деструкции тканей в цельной крови выявляются ранние нити фибрина, которые в последующем растворяются. Согласно нашим данным, появление ранних нитей фибрина свидетельствует о наличии ТГС.

Первые капли крови, вытекающие из вены, не исследуют, а последующие набирают на часовое стекло. Наблюдение ведется при комнатной температуре в проходящем свете.

Сразу же вдоль капли проводят стеклянным крючочком с загнутым концом, отмечают время появления и исчезновения ранних нитей фибрина, а также образования окончательного фибринового сгустка.

У больных с выраженным ТГС ранние нити фибрина появляются через 20—40 с после взятия крови. У здоровых людей ранние нити фибрина не появляются.

«Кровотечения и тромбозы при оториноларингологических заболеваниях»,
Г.А.Фейгин, Б.И.Кузник

Интервал времени от поступления первой порции крови в первую пробирку до конца свертывания крови во второй пробирке регистрируют как скорость свертывания крови.

При этом можно внести поправку на время, которое потребовалось для заполнения кровью первой пробирки. Двухпробирочный тест производят лишь для того, чтобы исключить влияние турбулентного движения крови. Пример.

Во вторую пробирку кровь начала поступать…

Среди методов, позволяющих выявить нарушения в коагуляционном гемостазе, мы считаем целесообразным определять время свертывания (Lee, White, 1913), каолиновое (Harttersley, 1966), кефалин-каолиновое (Caen et al.

, 1968), протромбиновое (Quick, 1966) и тромбиновое время (Biggs, Мс Farlane, 1962), концентрацию фибриногена (Р. А. Рутберг, 1961; М. С.

Мачабели, 1962) и гепарина (Rabli, 1970), активность антитромбина-III (Henson, Loeliger, 1963; К….

В камере Горяева проводят прямой подсчет тромбоцитов, используя в качестве разводящей жидкости 1% раствор оксалата аммония, который гемолизирует эритроциты.

Исследования можно проводить в капиллярной или венозной крови.

Кровь набирают до метки 01 в смеситель для эритроцитов и разводят оксалатом аммония до метки 101, после чего содержимое перемешивают в течение 3 мин. За этот срок эритроциты…

Пробирку с 0,2 мл плазмы и с одним из разведений гемолизата прогревают на водяной бане при 37° С в течение 1 мин, а затем 0,05 мл гемолизата добавляют в плазму и включают секундомер. В проходящем свете при постоянном покачивании пробирки отмечают появление видимых агрегатов тромбоцитов («малые крошки») и останавливают секундомер. Сначала проводят исследования с разведением…

«Тест-тромбин» содержит 50 ед тромбина. Перед употреблением в ампулу, содержащую сухой тромбин, добавляют 1 мл 0,9% раствора хлорида натрия, взбалтывают и 0,2 мл переносят в отдельную пробирку, в которую добавляют 0,5 мл крови или нитратной плазмы. Образование сгустка в норме происходит за 5—11 с, что соответствует концентрации фибриногена 2—4 г/л. Замедление времени свертывания до 60…

Источник: https://www.medkursor.ru/biblioteka/73/583/16351.html

Предмет, разделы и методы патологии. Основные понятия общей нозологии

Этаноловый тест

Сохрани ссылку в одной из сетей:

1. Время свертывания (по Ли-Уайту).Заключается в измерении временикоагуляции венозной крови in vitro при37°С. В норме показатель составляет 8-12мин. Характеризует общую способностькрови к свертыванию.

2. Протромбиновый(тромбопластиновый) тест Квика.Характеризует процесссвертывания по внешнему пути, чтодостигается добавлением к исследуемойрекальцифицированной плазме тканевоготромбопластина определенной активности.Нормальное время свертывания составляетпри использовании этого метода 10-18 с.,нормальный протромбиновый индекс -90-105%.

3. Активированноепарциальное (частичное) тромбопластиновоевремя (АПТВ-АПЧВ).Заключаетсяв измерении времени свертываниярекальцифицированной плазмы в условияхстандартной активации фосфолипидами(кефалином) и контактом с чужероднойповерхностью (каолином). В зависимостиот вида стандарта АПТВ (АПЧВ) составляет30-40 с. Характеризует внутренний путьсвертывания.

4. Тромбиновое время.Оценивается конечный этап коагуляции(образование фибрина из фибриногена)по времени свертывания плазмы подвлиянием раствора тромбина. Нормальныйпоказатель равен 11,3-18,5 с. Характеризуетконечный этап гемокоагуляции —образование фибрина.

5. Этаноловый тест.При добавлении к плазме 50% этанола через10 минут появляется желеобразная масса(паракоагулят). Это говорит о наличии вплазме комплексов фибрин-мономеров сфибриногеном и продуктами его деградацииплазмином, то есть о наличии активноготромбина и тромбообразования. Тестпроводится при температуре не выше 26оС и результатопределяется ровно через 10 минут.

6. Фенантролиновый тест.Основан на оценке времени появления вбедной тромбоцитами не замороженнойцитратной плазме хлопьев фибрина(паракоагулята) после добавления к нейфенантролина.

В отличие от этаноловоготеста является более точным количественнымметодом определения в плазме растворимыхфибрин-мономерных комплексов (РФМК),что позволяет более достоверно выявитьтромботические и предтромботическиесостояния. У здоровых людей времяпаракоагуляции составляет от 52 с. иболее.

Время паракоагуляции соответствуетразличным концентрациям РФМК в плазме.Нормальные показатели — 30-50 мкг/мл.

Нормальныепоказатели системы гемостаза и ихосновные сдвиги

Время капиллярного кровотечения по Дьюку2-5 мин.Укорочение времени – усиление агрегации тромбоцитов либо увеличение их числа. Удлинение – снижение способности тромбоцитов к агрегации либо снижение числа тромбоцитов.
Количество тромбоцитов150 -405109/л.Уменьшение числа тромбоцитов – тромбоцитопения, увеличение – тромбоцитоз.
Гемолизат-агрегационный тест11-17с.Укорочение времени – усиление агрегации тромбоцитов, удлинение – снижение способности тромбоцитов к агрегации.
Время свертывания8-12 мин.Укорочение времени – повышение общей способности крови к свертыванию, удлинение – снижение обшей способности крови к свертыванию.
Протромбиновый тест Протромбиновый индекс10-18 с.90-105%Укорочение времени и увеличение индекса – усиление активности коагуляционного гемостаза по внешнему пути свертывания, удлинение времени и уменьшение индекса – уменьшение активности коагуляционного гемостаза по внешнему пути свертывания. Эти показатели отражают нарушения II фазы свертывания.
АПTB-АПЧВ (каолиновое время)30-50 сУкорочение времени – усиление активности коагуляционного гемостаза по внутреннему пути свертывания, удлинение – уменьшение активности коагуляционного гемостаза но внутреннему пути свертывания. Эти показатели отражают нарушения II фазы свертывания.
Тромбиновое время14-16 сИзменение конечного этапа гемокоагуляции – образования фибрина. Укорочение времени – гиперкоагуляция, удлинение – гипокоагуляция
Этаноловый тестОбразование сгустка через 10 минут при температуре не выше 26°С – качественный показатель скрытой гиперкоагуляции, свидетельствующий о наличии в плазме активированного тромбина.
Фенантролино-вый тест30-50 мкг/млУвеличение количества РФМК в плазме – гиперкоагуляция.

А. Оценкасостояния тромбоцитарно-сосудистогогемостаза

  1. Определить, имеется ли изменение времени кровотечения. Укорочение времени кровотечения указывает на активацию сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, удлинение времени кровотечения свидетельствует об угнетении сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.

  2. Определить, связана ли активация сосудисто-тромбоцитарного гемостаза или угнетение сосудисто-тромбоцитарного гемостаза с количественными или качественными изменениями тромбоцитов.

    Снижение агрегации тромбоцитов возможно вследствие тромбоцитопении (оценивается число тромбоцитов) или тромбоцитопатии (удлинение времени агрегации при гемолизат-агрегационном тесте).

    Усиление агрегации тромбоцитов может быть вызвано тромбоцитозом либо воздействием индукторов адгезии и агрегации (укорочение времени агрегации при гемолизат-агрегационном тесте).

Б.Оценка состояния коагуляционного(плазменного) гемостаза

1. По длительности временисвертывания определяется, имеет лиместо нарушение коагуляционного(плазменного) звена гемостаза. Еслинаблюдается укорочение временисвертывания, это обозначается какгиперкоагуляция. Если время свертыванияудлинено, то имеет место гипокоагуляция.

2. При обнаружении изменений состороны плазменного гемостазаустанавливают, имеется ли нарушениевнешнего пути (по изменению протромбиновоговремени или индекса), или внутреннегопути (тест АПТВ-АЧТВ) гемокоагуляции.

Если отмечается при проведении этихтестов укорочение времени свертывания,то это свидетельствует о гиперкоагуляциипо внешнему, внутреннему или обоимпутям. Если время свертывания удлинено,имеет место гипокоагуляция.

3. Определить, имеется ли нарушениеконечного этапа коагуляционногогемостаза по изменению тромбиновоговремени. Если тромбиновое время укорочено,это свидетельствует об усиленномобразовании фибрина из фибриногена.При удлинении тромбинового временинаблюдается угнетение этого процесса— гипокоагуляция.

4. Оценить этаноловый ифенантролиновый тесты. Если эти тестыпоказывают увеличение скоростиобразования сгустка (этаноловый тест)или увеличение количества РФМК(фенантролиновый тест), то имеетсягиперкоагуляиия. Если гиперкоагуляцияопределяется только по этаноловому илифенантролиновому тесту, это говорит оскрытой активации плазменного гемостаза.

Показатели гемостаза,свидетельствующие о развитии ДВС –синдрома:

  1. Время свертывания крови – ↑.

  2. Количество тромбоцитов – ↓.

  3. Фибриноген – ↓.

  4. Тромбиновое время – ↑.

  5. Протромбиновое время – ↑.

  6. Продукты деградации фибрина – ↑.

Примеры типовыхисследований системы гемостаза

Задача1

А. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз
Время кровотеченияЧисло тромбоцитовГемолизат-агрегационный тест
Норма: 2-5 минут150-400109/л11-1 7 секунд
11 минут120109/л20 секунд
Б. Коагуляционный (плазменный) гемостаз
Время свертыванияПротром-биновое времяПро-тром-биновый индексАПТВ-АЧТВТромбино-вое времяЭтаноло-вый тестФенант-ролино-выйтест
8- 12 минут10-18 секунд90-105%30-40 секунд11,3-18,5 секундОбразова-ние сгустка через 10 минут30-50мкг/л
9 минут1 2 секунд100%40 секунд14 секундОтрица-тельный40 мкг/л

Заключение:Угнетение тромбоцитарно-сосудистогогемостаза. Тромбоцитопения.

Задача2

А. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз
Время кровотеченияЧисло тромбоцитовГемолизат-агрегационный тест
Норма: 2-5 минут190-40510 9/л11-17 секунд
12 минут26010 9/л35 секунд
Б. Коагуляционный (плазменный) гемостаз
Время свертыванияПротром-биновое времяПро-тром-биновый индексAПTB-АЧТВТромби-новое времяЭтаноло-вый тестФенан-троли-новый тест
1-12 минут10-18 секунд90-105%30-40 сек-унд11,3-18,5 секундОбразо-вание сгустка через 10 минут30-50мкг/л
7 минут1 6 секунд98%38 сек-унд15 секундОтрица-тельныйОтри-цатель-ный

Заключение:Угнетение тромбоцитарно-сосудистогогемостаза. Тромбоцитопатия.

  1. Документ

    … 1 Тема: «Предмет, разделы и методы патофизиологии. Основныепонятияобщейнозологии». 2. Форма … патологии человека. Моделирование – основнойметод патофизиологии. Разделы патофизиологии. Патофизиология включает три основныхраздела: общуюнозологию

  2. Документ

    … в патологии.». Задания для самостоятельной работы в альбомах (IV семестр): Введение. Предмет, разделы и методы патофизиологии. Основныепонятияобщейнозологии. Составить …

  3. Документ

    … 2014 1. Занятие №1 Тема: «Предмет, разделы и методы патофизиологии. Основныепонятияобщейнозологии». 5 1. Занятие № 2 Тема: … формах патологии тканей, органов и их физиологических систем. Общаянозология. В рамках общейнозологии

  4. Документ

    … 2014 1.Тема №1: «Введение. Предмет, разделы и методы патофизиологии. Основныепонятияобщейнозологии». 5 1. Тема №2: «Патогенное … Общаянозология; повреждение клетки; патогенное действие факторов внешней и внутренней среды; патология

  5. Документ

    … по разделу «Общаянозология». Патологическая физиология: определение, предмет и задачи, ее связь с другими дисциплинами. Методы … данных направлений на современном этапе. Основныепонятияобщейпатологии: здоровье, болезнь, патологическая реакция, …

Другие похожие документы..

Источник: https://gigabaza.ru/doc/126771-p36.html

Этаноловый тест

Этаноловый тест

Этаноловый тест – исследование свертывающей системы крови, основанное на полимеризации мономерных молекул фибрина при введении в плазму раствора этилового спирта. Анализ позволяет оценить процесс внутрисосудистой гемокоагуляции, показан при проявлениях ДВС-синдрома, склонности к формированию тромбов.

Назначается пациентам с ожогами, травмами, обморожениями, онкопатологиями, лейкозами, инфекционными заболеваниями, тромбозами, при подготовке к операциям. Забор биоматериала производится из вены, результат оценивается по изменениям плазмы после добавления этанола. В норме определяется помутнение, некоторая зернистость образца.

Итоговые данные подготавливаются за 1 день.

Этаноловый тест – исследование свертывающей системы крови, основанное на полимеризации мономерных молекул фибрина при введении в плазму раствора этилового спирта. Анализ позволяет оценить процесс внутрисосудистой гемокоагуляции, показан при проявлениях ДВС-синдрома, склонности к формированию тромбов.

Назначается пациентам с ожогами, травмами, обморожениями, онкопатологиями, лейкозами, инфекционными заболеваниями, тромбозами, при подготовке к операциям. Забор биоматериала производится из вены, результат оценивается по изменениям плазмы после добавления этанола. В норме определяется помутнение, некоторая зернистость образца.

Итоговые данные подготавливаются за 1 день.

Повреждение стенки сосуда приводит к формированию тромба, который препятствует кровотечению. После его естественного распада в плазме циркулируют промежуточные продукты фибринолиза – растворимые фибрин-мономерные комплексы.

Этаноловый тест используется для выявления РФМК: в плазму добавляется 50% раствор этилового спирта, из комплексов высвобождаются мономеры фибрина, происходит их полимеризация, образуется гель в виде сгустка, хлопьев. Преимуществом анализа является высокая скорость выполнения, что особенно важно в экстренных ситуациях с вероятностью кровотечений.

Основной недостаток теста – низкая чувствительность, результат информативен при концентрации фибриногена  более 100 мг/мл.

Показания

ДВС-синдром  – нарушение гемокоагуляции, развивающееся при массивном высвобождении из тканей тромбопластических соединений. В мелких сосудах образуются тромбы, повреждаются органы и ткани.

Затем возникает повышенная кровоточивость. Фаза гиперкоагуляции сопровождается усиленным фибринолизом, образованием большого количества РФМК. Их определение производится с помощью этаноловой пробы.

Показания:

  • Симптомы ДВС-синдрома. Исследование выполняется в рамках диагностики первой стадии, проявляющейся посинением пальцев, ушей, кончика носа, снижением чувствительности, нарушением движений, потерей сознания, сосудистой гипотонией, учащением дыхания, желтухой, уменьшением объема мочи. Показано пациентам с онкологическими, акушерскими патологиями, инфекциями, ожогами, отморожениями, травмами, лейкозами, после объемных операций.
  • Повышенное тромбообразование. Анализ позволяет предварительно диагностировать нарушение баланса свертывающей и противосвертывающей систем. Назначается при тяжести в ногах, отечности, болях, изменении цвета кожных покровов, нарушениях работы внутренних органов (рвоте, тошноте, аритмии  и т. д.). В группе риска больные, в анамнезе которых присутствуют ишемические инсульты, инфаркты, тромбоэмболии.
  • Признаки снижения гемокоагуляции. Тест выявляет недостаток тромбообразующих факторов. Показан при спонтанных носовых кровотечениях, обильных менструациях, кровоточивости десен, долгой остановке кровотечения при порезах, травмах.

Подготовка к анализу

Биоматериалом является венозная кровь. Ее забор рекомендуется выполнять утром. Правила подготовки:

  1. Процедура осуществляется натощак, минимальный перерыв в приеме пищи – 4 часа. Пить чистую воду разрешено без ограничений.
  2. Накануне следует исключить стрессовые ситуации – интенсивные физические и умственные нагрузки, эмоциональное напряжение. Последние 30 минут рекомендуется провести сидя, расслабившись.
  3. За неделю нужно сообщить врачу об используемых лекарствах, обсудить их влияние на процессы внутрисосудистого свертывания. По необходимости препараты будут на время отменены.
  4. Запрещено курить за полчаса до сдачи биоматериала.

Кровь забирается методом венепункции, хранится и транспортируется в пробирке с цитратом натрия. Этаноловый тест основан на процессе образования фибриновых нитей: в пробирку с плазмой вводят раствор этанола, в течение 10 минут оценивают изменения.

Нормальные значения

Этаноловый тест в норме отрицателен. Определяется помутнение образца биоматериала, допускается появление незначительной зернистости. Дальнейшая тактика обследования определяется индивидуально:

  • При наличии клинической картины ДВС-синдрома назначаются более чувствительные анализы.
  • Рассматриваются другие причины имеющихся симптомов.

Положительный результат

Положительный этаноловый тест подтверждает наличие большого количества РМФК. Свертывание мономеров фибрина после добавления 50% этанола приводит к образованию геля в образце плазмы. Причинами положительной пробы являются заболевания и состояния, сопровождающиеся ДВС-синдромом:

  • Деструкция тканей. Гиперкоагуляция определяется при отморожениях, ожогах, травмах, операциях, остром гемолизе, лейкозе, лучевой болезни, некрозах на фоне органных заболеваний.
  • Инфекции, сепсис . Повышение уровня РФМК происходит при острых бактериальных и вирусных инфекциях, токсическом шоке.
  • Акушерско-гинекологические патологии. Проба положительна при внутриутробной гибели плода, эклампсии, отслойке плаценты, атонии матки.
  • Хронические заболевания. Затяжной ДВС-синдром не всегда сопровождается повышением уровня РФМК. Положительная проба возможна при хронических иммунных и иммунокомплексных болезнях, вирусных инфекциях (ВИЧ, гепатит), онкопатологии, затяжном сепсисе.

Лечение отклонений от нормы

Этаноловый тест – экспресс-метод оценки системы свертывания крови. Выполняется с целью диагностики синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания, его дифференциации от первичного фибриногенолиза.

Исследование находит широкое применение в медицинской практике, назначается терапевтами, хирургами, травматологами, инфекционистами, акушерами-гинекологами, онкологами.

С результатами пробы необходимо в кратчайшие сроки обратиться к лечащему врачу.

Источник: https://www.KrasotaiMedicina.ru/lab-test/hemostasis/ethanol-test

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.